1 简介
薄层色谱简称TLC(Thin layer chromatography)
TLC一般用于对混合的有机化合物进行分离和检测
实验室常用:硅胶薄层色谱、聚酰胺薄层色谱
分离用大板,检测用小板
2 原理
不同的物质在薄层板上的迁移速度不同
注:可以理解为挑选长跑运动员,同一起点出发,不同的人能力不同,有的跑的快,有的跑得慢,这样就能分开了。
Rf:比移值
Rf=样品移动距离/展开剂移动距离
3 常用器材
板子、透明直尺、毛细管、铅笔、展开缸、展开剂
4 一般操作流程
4.1 确定点样点
用铅笔和透明直尺在距板下端5mm处轻轻画一条线,称为起始线
在起始线上每间隔5mm点一个点,用铅笔在点的下方表明序号(可以只标5的倍数,1、5、10等)
4.2 点样
用毛细管蘸取样品溶液(5mm-10mm高即可),然后将其点在之前标在薄层板的点上,点的直径在5mm即可,不可过大。
PS:如果样品过稀,可以等点的溶剂挥发后,在原来的点上再点1-2次。(注意点的直径)
PS:如果样品太浓,会超载,导致样品跑不上去或者拖尾严重,可以取一点放到1.5ml的EP管里进行稀释。
4.3 展开
首先根据板的大小选取展开缸,加入展开剂
然后将板放到展开缸中,盖上盖子
注意:不要让板倒向另一侧,很容易使点直接接触展开剂,导致结果失效。
注意观察溶剂前沿,待溶剂前沿距板的顶端5mm-10mm时用镊子将板取出结束展开
4.4 显色
用镊子夹住板挥动数次,使板上的展开剂挥发(可以用吹风机)
注意:吹风机不要吹硅胶面,要吹玻璃面,不然之后硅胶面会剥落
将板拿到紫外灯下,分别用nm和nm的光进行观察
然后用镊子将板浸入显色剂中,浸没后立即取出
注意:显色剂为强腐蚀性,注意防护。(成分为乙醇:浓硫酸 90:10)
打开烤灯,将浸没后的板放到烤箱中,使显色剂挥发,并使点显色
注意:一定要留心观察板的颜色,不要使板烤焦
显色后将板取出放在一张卫生纸上进行观察
注意:不要放在桌面上,板的背面还有显色剂,显色剂会腐蚀桌面