试剂盒

赵成烨 2023-04-04 10:51:05
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ELISA原理

双抗体夹心elisa

ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)是一种常用的免疫学检测技术,利用特异性抗体与待检测分子结合来实现定量或半定量检测。其基本原理包括以下步骤:

固相化:将特异性抗体固定在微孔板上。
样品加入:待检样品加入到已经涂有抗体的微孔中,并静置一段时间使得目标分子与其对应的抗体发生结合反应。
洗涤:洗去未结合的杂质和非特异性蛋白,以减少假阳性结果。
二次抗体添加:加入另外一种被标记过的、针对待检物种类不同但能够识别该物种中某个亚型(如IgG)的二次抗体,这些二次抗体通常会与底物酶(如辣根过氧化物酶HRP)等连接并形成复合物。
底物添加:加入适当底物后,在适宜条件下进行反应产生可见信号,例如颜色变化或荧光强度增强等。此时目标分子含有相应表位即被捕获并可以通过信号转换器转换为可见光信号。
读板:使用光度计或荧光计等仪器测量反应产生的信号强度,从而确定待检样品中目标分子的含量。

要求

灵敏度高:最小检出量为xxpg/ml,
特异性强:与人EGF、Epo、FGF basic、G-CSF、GDNF、GM-CSF、HGF、IGF-I、IGF-II、IL-13、KGF、PDGF-AB等均没有交叉反应
重复性好:板内、板间变异系数均小于10%