纸片法
将细菌的菌悬液涂布接种与平板上
将平板分为4个区,并在平板底部标注菌种名称及所用抗菌剂名称
用镊子夹取含不同药物的过滤片,将纸片放入平板不同区域的中心
取出平板,倒置与37度恒温培养箱中培养24h,24h后即可观察抑菌圈。
牛津杯法
将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。
将融化的PDA培养基冷却到50℃左右混入试验菌,
将混有菌的培养基5 ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。
以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯
(内径6mm、外径8mm、高10 mm的圆形小管,管的两端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),
轻轻加压,使其与培养基接触无空隙,
在杯中加入待检样品(发酵液),
牛津杯一般可以装240微升,在放置牛津杯、加注药品的时候要小心,以免药物渗漏,
将试验平板移动至培养箱的过程中要避免牛津杯的打翻。
加满后培养基正面向上置37℃培养16-18小时,观察结果,抑菌圈用尺直接量就可以。
在培养中,一方面试验菌开始生长,另一方面抗生素呈球面扩散,离杯越近,抗生素浓度越大,离杯越远抗生素浓度越小。
随着抗生素浓度减小,有一条最低抑菌浓度带,在带范围内,菌不能生长,而呈透明的圆圈,这就叫“抑菌圈”。
抗生素浓度越高,抑菌圈越大。