0 前言
效价：效价是指某一物质引起生物反应的功效单位
抗生素理论效价：抗生素纯品的重量与效价单位的折算比率
例如：庆大霉素 1000单位／mg
酶的效价单位：
单位（U）：也叫国际单位(IU，International unit)，表示最适反应条件下每秒钟催化一个摩尔底物浓度变化所需酶量。
关于效价单位：1KU=1000U（U：units KU：kilounit）
酶的度量单位
酶单位的常见表示方法：
1.习惯单位：60年代以前,酶单位没有统一的标准,习惯上都使用各自测定方法的习惯定义.因此不同酶、甚至同一酶不同测定法都可以有不同的定义.所以极其混乱.由于方法不同,有的基至以测得的物理量如吸光度的变化来表示,如卡门氏单位,换算极其麻烦.
注：卡门氏单位：1ml血清在25℃,340nm,体积为3ml,光径为1cm每分钟光密度下降0.001的酶量
2.国际单位：61年国际生化学会（IUB）酶学委员会建议使用统一国际单位（IU）,规定一个国际单位（IU）为在实验规定条件下,每分钟催化一个微摩尔底物浓度变化所需酶量.
3.卡塔尔（kaltal）单位：此单位是72年酶学委员会提出的.实际上这才是全由国际单位组成的真正意义上酶国际单位.其是指,在最适反应条件下每秒钟催化一个摩尔底物浓度变化所需酶量.
国际单位的缺点：
1.从习惯单位换算成国际单位比较麻烦.
2.很多底物分子量不明如（淀粉酶等）难以执行.
3.由于各国的测定温度不同,其结果也不尽相同.因此,目前国内外仍多用习惯单位.
本文为整理转载，原贴为：体外酶实验的一些小总结
下面开始对酶实验进行简单介绍：
1 酶实验简介
酶实验括三个东西：酶、底物和产物。额外两个：缓冲液及终止液
1.1 酶
购买时酶单位一般是unit(简写U）或KU，实验中单位一般是U/ml
购买时有液体装和粉末装两种
具体单位需要看购买的酶官网上说明书
固体酶：如sigma的酪氨酸酶T3824-25KU来源于蘑菇中说明中为1000unit/mg,瓶内有少量粉末不能用来称量，所以只能用缓冲液如PBS加入一定体积（如1ml）之后混匀，此时酶的浓度为25KU/ml.
注意：固体酶不需要计算购买的酶的实际单位。酶的总量按照货号最后标注为准，T3824-25KU标注25KU就是含有25KU，即使说明书写了5g 15U/mg也不是说有5x15x1000=75KU的酶量。因为酶产品一般含有载体，载体也是有重量的。
注意：需要关注说明书中酶适用的PH、温度等条件。
液体装酶：一般需要计算购买的酶的实际单位。
如sigma的黄嘌呤氧化酶X1875-5UN，为瓶装液体，瓶身写有16mg protein/ml,0.7unit/mg protein,0.5ml，这样算下来酶的浓度为11.2U/ml,瓶内酶的总量为5.6U，就不能按照5U来计算了。
注：以上浓度计算为16x0.7=11.2U/ml；酶总量计算为16x0.7x0.5=5.6U
1.2 底物
具体物质可以参考购买酶说明书中的底物
单位有mol/ml、mg/ml 两种
粉末溶解时使用的溶剂与溶解酶的溶剂相同
1.3 产物
一般做酶实验时，检测酶活性指标一般有两种：检测产物OD值或检测产物OD值，一般检测产物OD值比较多。
用酶标仪检测的波长设置是按照检测指标中的物质的波长设置的。
1.4 缓冲液
有PBS、RO水两种，看酶适用的缓冲液条件。
1.5 终止液
一般是盐酸溶液或氢氧化钠溶液
但是加入终止液后可能会使产物OD值增加
终止液不是一定要加的，主要看酶反应在相应规定时间后是否继续反应。
2 酶实验设计
2.1 分组设计
正常酶组、正常对照组、阳性药组、阳性药对照组、样品酶组、样品对照组
为两大组：一组为酶组；另一组为对照组。样品及阳性药组设置6个浓度梯度，每个浓度设3个复孔
酶组内需要加酶
对照组为除不加酶外，其他试剂与酶组相同，体积相同，用缓冲液补足
对照组的作用是后续计算时扣除背景值的影响，另一个作用是观察样品与底物是否反应
2.2 体积设计
为实验便捷，一般用96孔板实验，所以总体积需要控制在250ul以下
一般是200ul或150ul体积，酶体积50ul、底物体积50ul，加样体积50ul，缓冲液50ul。
2.3 酶标仪OD值设计
一般选正常组扣除背景值即调零OD值（=正常酶组OD值-正常对照组OD值）为1.2左右为宜。
正常组凋零OD值-时间曲线分析：
一般OD值-时间曲线形状如下：
但是第一次设计剂量并不一定就这么完美，需要根据酶标仪检测的OD值对时间变化曲线进行分析，从而进行剂量调整。
3 调整的两种情况
在加入酶和底物后，设置检测时间点为1min、5min、10min、15min
3.1 如果检测出调零OD值变化不大，那么也有两种情况分析：
第一种：酶在较短时间内（1min）内反应完毕，出现的原因：酶的量过多，下一步注意设置酶的浓度梯度，底物的量先不变。
第二种：调零值为零，即没有产生底物，此时需要分析是否是酶的问题，是否忘记加酶活忘记加底物了。
3.2如果检测出OD值有变化，两种情况：
第一种：变化缓慢，如果曲线在上图曲线的右边即上升完毕趋于平缓，则说明反应过慢，需增加酶的量。
第二种：变化较快，如果曲线在上图曲线的左边即上升完毕趋于平缓，则说明反应过块，需降低酶的量。
3.3 补充
调整酶与底物体积使反应曲线与上图类似后，可按比例调整酶与底物的剂量或浓度，使得调零OD值达到1.2左右。
注意：细胞实验不同，酶、底物一般说明总量而不是浓度，如在200ul体系中2U单位的酶在15min内能与10mmol的底物反应完毕。
怎么样，听起来酶实验是不是比细胞实验简单多了？