1 细胞复苏
1.1 准备工作
1、将水浴锅加热至37℃备用
2、在细胞台中准备好完培（至少10ml），15ml离心管1个，100mm培养皿1个
3、将细胞冻存管从液氮罐中取出放置于-80℃冰箱中。
1.2 开始复苏
1、将细胞冻存管浸入37℃水浴锅中，不断晃动冻存管，使其尽快融化
2、将融化后的冻存管喷洒酒精后迅速转移到细胞台内，用酒精棉球/干棉球擦干冻存管表面
3、在15ml离心管中加入2-3ml完培
4、不必过火，直接拧开冻存管，用移液枪将冻存管内细胞转移到刚才的含完培的15ml离心管中
5、将15ml离心管拧上盖子，放到离心机中离心，注意配平离心机
6、在等待离心的过程中，向细胞台内的培养皿中加入8-10ml完培（无其他实验可顺带将完培封口）
7、离心结束，将离心管放入细胞台中，弃掉上清液，加入1-2ml完培（可从培养皿中取），用移液枪轻轻吹打使细胞分散开。
8、将离心管内的细胞悬液用移液枪滴加到培养皿中，加完后上下左右晃动培养皿，使细胞均匀分布
9、用记号笔在培养皿上标记好细胞种类，日期，姓名等信息，显微镜下观察后放入培养箱中培养（尽可能放在靠里的位置，减少被别人挪动的次数，防止细胞贴壁不好）
2 细胞换液
2.1 准备工作
准备完培、PBS
2.2 开始换液
1、将培养皿中的培养液吸弃
2、贴壁加1-2mlPBS，晃动培养皿清洗细胞
3、将培养皿中的PBS吸弃，加入6-10ml完培
3 细胞传代
3.1 准备工作
取15ml离心管1个
准备完培、PBS、胰酶
3.2 开始传代
1、将细胞培养皿内的旧液吸弃
2、向细胞培养皿中贴壁加1-2ml PBS，晃动培养皿使PBS冲洗细胞，然后将PBS吸弃
3、贴壁加胰酶1ml，晃动培养皿使胰酶将细胞消化下来，在显微镜下观察细胞状态，细胞变为圆形即为消化完毕。
4、加入等体积完培终止消化。
5、倾斜培养皿，使用移液枪吸取皿内溶液，并吹打培养皿上的细胞，将大部分细胞吹打下来即可。
6、将皿内的细胞悬液转移到15ml离心管中，离心
7、将离心后15ml离心管中的上清液吸弃，加入1-2ml完培
8、吹打细胞，使细胞分散
9、向培养皿中加入6-10ml完培，然后把细胞悬液滴加到培养皿中
10、晃动培养皿使细胞分散均匀，在培养皿表明标记好信息
4 细胞冻存
4.1 准备工作
1、配置冻存液
4.2 开始冻存
1、将细胞培养皿内的旧液吸弃
2、向细胞培养皿中贴壁加1-2ml PBS，晃动培养皿使PBS冲洗细胞，然后将PBS吸弃
3、贴壁加胰酶1ml，晃动培养皿使胰酶将细胞消化下来，在显微镜下观察细胞状态，细胞变为圆形即为消化完毕。
4、加入等体积完培终止消化。
5、倾斜培养皿，使用移液枪吸取皿内溶液，并吹打培养皿上的细胞，将大部分细胞吹打下来即可。
6、将皿内的细胞悬液转移到15ml离心管中，离心
7、将离心后15ml离心管中的上清液吸弃，加入2-4ml冻存液，吹打细胞，使细胞分散。
8、将细胞悬液转移至冻存管中，封口膜密封，做好标记
9、将冻存管放入程序降温盒中，将程序降温盒放入-80℃冰箱进行降温
10、至少4小时后可将程序降温盒中的细胞转移至液氮罐中永久冻存。