前言
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胰酶简介
胰蛋白酶（Trypsin）简称胰酶，是一种丝氨酸水解酶，能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养，以及体外细胞培养过程中，均会使用到胰蛋白酶消化液，用于水解细胞间蛋白质，使组织或细胞离散成单个细胞。
胰酶在37℃ pH 8.0条件下消化能力最强。
常用胰酶工作浓度为0.25%。
EDTA可以螯合钙镁离子，加速细胞间连接蛋白的水解，起到增强消化的效果。
EDTA常用浓度为0.9mM。
酚红是一种pH指示剂，溶液偏碱性时呈紫红色，偏酸性时呈橘红色，近中性时呈粉红色。
PBS磷酸盐缓冲液，具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用。
D-Hank’s磷酸盐缓冲液，具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用，不能用于5% 二氧化碳培养环境。
如果放入二氧化碳培养箱，溶液将迅速变酸。
胰酶类型
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于PBS，含EDTA，含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于PBS，不含EDTA，不含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于PBS，含EDTA，不含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于PBS，不含EDTA，含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于D-Hank’s，含EDTA，含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于D-Hank’s，不含EDTA，不含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于D-Hank’s，含EDTA，不含酚红
0.25%胰蛋白酶消化液，溶于D-Hank’s，不含EDTA
胰酶存储
近期使用：4℃
长期保存：-20℃
有效期：12个月。
避免反复冻融。
操作说明
贴壁细胞
1.吸去细胞培养液，用无菌的PBS、D-Hank’s液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。
注：因血清能够终止消化，洗涤细胞有助于增强消化效果。
2.加入适量本产品覆盖细胞，室温静置消化1-5 min。
3.显微镜下观察，当细胞出现明显收缩（用移液枪轻轻吹打细胞较容易将细胞吹打下来），吸除胰酶细胞消化液，加入含血清的细胞培养液，轻轻吹打细胞，制成细胞悬液，即可直接传代培养。
如果用移液枪轻轻吹打时很难使细胞从板底脱落，表明消化时间不够，可加入胰酶细胞消化液重新消化。
注意：应避免过度消化。
注：对当前细胞消化时间有经验之后可不用显微镜下观察。
注意事项
1.由于组织或细胞性质不同，应依据具体情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况。
2.胰酶不含抑菌剂，在使用过程中要特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染。
3.不宜4℃长期保存，避免反复冻融，建议分装成小份后-20℃保存。
4.对于胰酶中EDTA、酚红的选择，可以根据实验需要：
对于一般的肿瘤细胞，选择含EDTA的胰酶消化液
对于较敏感、脆弱的细胞，例如原代细胞及很容易消化的细胞，选择不含EDTA的胰酶消化液
如果细胞特别敏感，需要选择胰蛋白酶浓度更低的消化液
如果需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡，则选用不含EDTA的胰酶消化液。
5.PBS溶解的胰酶在低温冷冻保存后溶液呈黄色。这是由于温度导致溶液pH值发生变化，在正常解冻复温后即恢复为红色，不影响产品胰酶性能。