HPLC-MS/MS法同时测定xxx中xx种成分
参考文献
HPLC－MS /MS 法同时测定清心滋肾方中 27 种成分
1、HPLC-MS /MS 分析条件
色谱
以下为文章中例子，具体使用什么流动相，梯度洗脱程序如何设定需要自己摸索。
xx型号色谱柱(4.6mm×100mm1.8μm)
流动相：0.5%甲酸(A)-［甲醇-乙腈 ( 1 ∶ 1) ］(B)
梯度洗脱 (0～5 min，15%B; 3. 5 ～ 5 min，15% ～ 34% B; 5 ～ 9min，34% ～35%B; 9 ～ 11 min，35% ～ 56%B; 11 ～12 min，56% ～ 65% B; 12 ～ 14 min，65% ～ 15% B;14～18 min，15%B)
体积流量 0.5 mL/min
柱温40 ℃
进样量5μL
质谱
这个应该没什么可以摸索的
电喷雾离子源 (ESI) ;
正负离子扫描;
多反应监测 (MＲM) 模式;
离子化温度 (TEM)550 ℃;
喷雾电压 (IS) 5 500 V/ －4 500 V;
雾化气(GS1，N2) 50 kPa;
辅助气 (GS2，N2 ) 50 kPa;
气帘气 (CUR，N2) 20 kPa。
结果
通过液质联用鉴定样品所含xx种成分及各成分的质谱参数
溶液制备
对照品溶液
先配成母液，然后进行稀释,用于正离子检测和负离子检测
精密称取各对照品适量，50%甲醇溶解，涡旋混匀，制成质量浓度均为1mg/mL的溶液
取适量，50%甲醇制成质量浓度不同的标准品溶液(例如600 ng/mL)
精密吸取上述液体200 μL，加入800μL超纯水，涡旋混匀
超纯水逐级稀释成系列质量浓度，即得不同浓度的标准溶液
以小檗碱（600 ng/mL）为例，依次稀释至 120、60、30、12、6、3、1. 2、0. 6 ng /mL
内标溶液
同对照品溶液的制备
供试品溶液
药材煎煮，得相当于生药量为0.xxxg/mL的水煎液，平行3份，混匀
超纯水分别稀释20倍(A)、50倍(B)，涡旋混匀
4 ℃、12000 r/min离心10 min
精密取90μL上清液，加入内标溶液 A 或 B，涡旋混匀，即得。
方法学考察
专属性试验
分别精密取中间质量浓度的对照品溶液 A 或 B 90 μL，分别加入内标溶液 A 或
B 10 μL，涡旋混匀，进行HPLC/MS测定
结果要求：
溶剂峰无干扰
各成分色谱峰峰形理想
分离度良好
供试品、对照品溶液中其保留时间一致。
样品：供试品、对照品A、对照品B
线性关系考察
吸取对照品溶液 A 或 B 90 μL，分别加入内标溶液 A 或 B 10 μL，涡旋混匀
以对照品、内标峰面积比值为纵坐标(Y)，对照品质量浓度为横坐标(X)进行回归
以信噪比 3 ∶ 1 为检测限
要求：各成分在各自范围内线性关系良好。
注：即做各标准品的标准曲线，并做回归方程，R>