前言
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常用缓冲液简介
PBS(Phosphate Buffered Saline),即PBS磷酸盐缓冲液,是生物学、生物化学研究中使用较广泛的一种平衡盐溶液,常用于组织块的洗涤、细胞的漂洗、其他试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液等。
TBS(Tris Buffered Saline),即TBS缓冲液,可用于ELISA、Western Blot(WB)免疫印迹、免疫组化、原位杂交等相关免疫实验过程中的漂洗以及封闭液配制等。
TBST缓冲液,可应用于Western Blot实验中洗去膜上非特异性结合的抗体等试剂,以及免疫荧光、免疫组化等实验中封闭液的配制、一抗或二抗的配制、一抗或二抗孵育后的洗涤等,以降低背景,增强信噪比。
HBSS缓冲液,即Hank’s Balanced Salt Solution,Hank’s平衡盐溶液,是细胞实验中常用的磷酸盐缓冲液之一。具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用,可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液等。根据需要可添加钙、镁离子及酚红指示剂。
DPBS缓冲液,即Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline,杜氏磷酸缓冲盐溶液,是生物学、生物化学研究中使用较广泛的一种平衡盐溶液,比常规PBS缓冲液磷酸盐的含量略低。DPBS主要胚胎学方面的研究,可作为胚胎、组织的漂洗液、冻存液和培养液。可根据需要在DPBS中加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以维持培养物的基本营养。
EBSS缓冲液,即Earle’s Balanced salt Solution,Earle’s平衡盐溶液,是细胞实验中常用的磷酸盐缓冲液之一。具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用,可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液等。根据需要可添加钙、镁离子及酚红指示剂。
缓冲液产品类型
PBS干粉
1×PBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
10×PBS漂洗缓冲液(浓缩液)
TBS干粉
1×TBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
10×TBS漂洗缓冲液(浓缩液)
1×TPBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
10×TPBS漂洗缓冲液(浓缩液)
HBSS缓冲液(含钙镁,含酚红)
HBSS缓冲液(含钙镁,无酚红)
HBSS缓冲液(无钙镁,含酚红)
HBSS缓冲液(无钙镁,无酚红)
DPBS缓冲液,含钙镁离子
DPBS缓冲液,无钙镁离子
EBSS缓冲液(含钙镁,含酚红)
EBSS缓冲液(含钙镁,无酚红)
EBSS缓冲液(无钙镁,含酚红)
EBSS缓冲液(无钙镁,无酚红)
PBS干粉
配制成溶液后可应用于ELISA、Western Blot(WB)免疫印迹、免疫组化、免疫荧光等免疫相关实验过程中所需的漂洗以及封闭液配制等
注:使用纯水溶解即可
注:细胞培养建议购买1×PBS即用型水剂(反正用的也不多,水剂也不贵,别省这点钱,如果细胞污染了得不偿失)
可根据具体实验要求加入所需浓度的去垢剂(如吐温20等)。
碱性磷酸酶AP标记体系相关实验,应选择TBS缓冲液,避免PBS对碱性磷酸酶的影响。
PBS干粉(可配2L PBS)主要组分为10 mM磷酸钠,150 mM NaCl,pH7.2-7.4@25℃。
常温运输,干燥处保存,有效期24个月。(密封包装的话过期也没事)
注意:干粉不含钾离子,如果需要含钾离子的PBS,建议购买含钾离子的即用型水剂PBS。
1×PBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
可直接使用,置于4℃保存。
产品成分:2.7 mM KCl,2.0 mM KH2PO4,137 mM NaCl,10 mM Na2HPO4,pH 7.3-7.5@25℃。
0.1 μm过滤除菌,未检测到DNase及RNase活性。
10×PBS漂洗缓冲液(浓缩液)
即10倍浓缩的PBS磷酸盐缓冲液
使用前取100 ml 10×PBS与900 ml纯水混合均匀后即得到pH为7.3-7.5的含0.01 M磷酸盐的1×PBS溶液。
产品成分:27 mM KCl,20 mM KH2PO4,1.37 M NaCl,100 mM Na2HPO4,稀释10倍后pH 7.3-7.5@25℃。
TBS干粉
纯水溶解即得TBS缓冲液
若需配制成TBST缓冲液,则将TBS缓冲液(干粉)用蒸馏水溶解后,加入1 mL Tween-20,用蒸馏水定容到2000 mL,即得含0.05%吐温的1×TBST缓冲液。
1×TBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
即开即用,可置于4℃保存。
主要组分为10 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.2-7.6@25℃。
注意:本产品为非无菌生产。
10×TBS漂洗缓冲液(浓缩液)
即10倍浓缩的TBS缓冲液
每100 mL 10×TBS与900 mL去离子水或蒸馏水充分混匀,即得到含10 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.2-7.6@25℃的1×TBS工作液。
产品成分:00 mM Tris,1.5 M NaCl
1×TPBS漂洗缓冲液(即用型水剂)
即开即用
组分为10 mM Tris,150 mM NaCl,0.05% Tween-20,pH 7.2-7.6@25℃。
室温储存
10×PBS漂洗缓冲液(浓缩液)
即10倍浓缩的TPBS缓冲液
使用前取100 ml 10×TPBS与900 ml纯水混合均匀后即即得到含10 mM Tris,150 mM NaCl,0.05% Tween-20,pH 7.2-7.6@25℃的1×TBST工作液。
注:稀释成1×工作液后,建议4℃保存,并在一个月内用完,如室温保存,建议一周内使用。
注:出现结晶析出,请置于37℃水浴至完全溶解,不影响使用。
HBSS缓冲液
可直接使用
注意:HBSS缓冲液不能用于5% CO2培养环境。如果放入CO2培养箱,溶液将迅速变酸。
无钙镁离子无酚红的HBSS缓冲液成分为NaCl,KCl,KH2PO4,Na2HPO4•12H2O,NaHCO3,D-葡萄糖
注:酚红为pH指示剂。
注:钙镁离子为:CaCl2(无水)、MgCl2•6H2O、MgSO4•7H2O
DPBS缓冲液
可直接使用
比常规PBS缓冲液磷酸盐的含量略低。
主要应用于胚胎学方面的研究,可作为胚胎、组织的漂洗液、冻存液和培养液。
可根据需要在DPBS中加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以维持培养物的基本营养。
产品成分:2.68 mM KCl,1.47 mM KH2PO4,137 mM NaCl,8.0 mM Na2HPO4,0.9 mM CaCl2,0.49 mM MgCl2,pH 7.0-7.2@25℃。经0.1 μm过滤除菌。
注意:含有钙镁离子的DPBS,易产生微量沉淀,经温水浴后即可溶解。若产生较多沉淀无法溶解时,请停止使用。
EBSS缓冲液
可直接使用
本产品经0.1 μm过滤除菌,pH 7.0-8.1@25℃,渗透压270-310 mOsm/kg
无钙镁离子无酚红的HBSS缓冲液成分为NaCl,KCl,无水NaH2PO4,NaHCO3,D-葡萄糖
注:酚红为pH指示剂。
注:钙镁离子为:CaCl2(无水)、MgSO4•7H2O